期刊简介
本刊是由广西医科大学主办的国内外公开发行的医学学术期刊。内容丰富，形式多样，科学性强，有实用性。主要设有论著、经验交流、调查研究、技术与方法、护理园地、病例报告等栏目。
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首页>广西医科大学学报杂志
- 杂志名称：广西医科大学学报杂志
- 主管单位：广西医科大学
- 主办单位：广西医科大学
- 国际刊号：1005-930X
- 国内刊号：45-1211/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：全国高校自然科学优秀学报期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
Caveolin-1基因PEGFP-N1真核表达载体的构建及表达
张姗妮；潘灵辉
关键词：Caveolin-1, pEGFP-N1载体, 真核表达载体
摘要：目的:克隆caveolin-1(CAV1)基因开放阅读框的cDNA序列,构建PEGFP-N1/CAV1的真核表达载体.方法:设计并合成带酶切位点及保护碱基的引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,PEGFP-N1载体及caveolin-1基因片段进行限制性双酶切,电泳后回收切开的PEGFP-N1 及caveolin-1片段,经连接反应后构建PEGFP-N1/CAV1真核表达载体.结果:PEGFP-N1/CAV1重组质粒经PCR电泳结果显示,得到一条在555 bp的片段;重组质粒经限制性内酶切双酶切电泳结果证实,可释放一条在555 bp的片段和4.8 kbp的载体片段;重组质粒测序结果,经BLAST比对,100%符合;瞬时转染宫颈癌Hela细胞48 h荧光显微镜及实时荧光定量PCR证实重组质粒在宫颈癌Hela中得到表达.结论:成功构建了同时携带有绿色荧光蛋白及G418筛选位点的PEGFP-N1/CAV1真核表达载体复合体.
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