期刊简介
本刊是由广西医科大学主办的国内外公开发行的医学学术期刊。内容丰富，形式多样，科学性强，有实用性。主要设有论著、经验交流、调查研究、技术与方法、护理园地、病例报告等栏目。
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首页>广西医科大学学报杂志
- 杂志名称：广西医科大学学报杂志
- 主管单位：广西医科大学
- 主办单位：广西医科大学
- 国际刊号：1005-930X
- 国内刊号：45-1211/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：全国高校自然科学优秀学报期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
转录因子E2F-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
王晓通；李雷；钱倩；谢玉波；肖强
关键词：慢病毒载体, E2F-1, RNAi
摘要：目的:构建细胞周期相关转录因子E2F-1 RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体.方法:选取E2F-1基因的19 nt特异性序列,设计针对E2F-1的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pLentiLox 3.7(pLL 3.7)慢病毒表达载体中,Xba I和 Not I进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,在脂质体的介导下将慢病毒的混合包装载体质粒和包含E2F-1基因RNAi的重组慢病毒载体共转染293FT细胞,包装成病毒48 h后,收集病毒颗粒,孔稀释法测定病毒滴度.结果:双酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确;293FT细胞包装E2F-1基因RNAi的重组慢病毒载体成功;收集的细胞培养上清液中,病毒的滴度为5×107 TU/mL.结论:成功构建人E2F-1基因RNAi慢病毒载体,为研究E2F-1对于胃癌生长的影响提供了稳定的转染细胞载体.
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